Heterogenitatea moleculară și implicațiile prognostice ale neoplaziei colorectale avansate
Subiecte
Acest articol a fost actualizat
rezumat
Fundal:
Nu este sigur dacă cancerele colorectale sincrone (S-CRC) se dezvoltă preferențial prin metilarea ADN generalizată și dacă au un prognostic mai prost decât CRC solitar. Deoarece tumorile instabilității microsateliților (MSI) pot confunda efectul metilării S-CRC asupra rezultatului, am abordat această problemă într-o serie de CRC caracterizate prin statutul BRAF și MS.
Metode:
Demografia, înregistrările clinicopatologice și supraviețuirea specifică bolii (DSS) au fost evaluate în 881 CRC rezecate consecutiv și au fost supuse unei colonoscopii complete. Toate tumorile au fost tipizate pentru BRAF c.1799T> A mutație și starea MS, urmată de căutarea mutației liniei germinale la pacienții cu MSI CRC.
Rezultate:
Cancerul colorectal sincron (50/881, 5,7%) a fost asociat cu stadiul IV microsatelit stabil (MSS) CRS (19/205, 9,3%, P = 0,001) și cu HNPCC (9/32, 28%, P c. 1799T> O mutație (HR 2,16; IC 95% 1,25-3,73; P = 0,01) au fost predictori independenți de stadiul morții prin MSS CRC. Supraviețuirea specifică bolii pacienților cu RMN MSI nu a fost afectată de S-CRC (HR 0,74, IC 95% 0,09 până la 5,75, P = 0,77).
Concluzie:
CRC-uri stabile la microsateliți au un prognostic mai rău dacă sunt diagnosticate S-CRC sau adenom sincron avansat. Apariția și agresivitatea crescută a neoplaziei sincrone avansate a SMS-urilor nu sunt asociate cu mutația BRAF .
Principal
Două sau mai multe carcinoame colorectale primare sunt detectate la 2 până la 5% din toți pacienții nou diagnosticați cu cancer colorectal (CRC) (Adloff și colab., 1989; Passman și colab., 1996; Chen și Sheen-Chen, 2000; Oya și colab., 2003; Papadopoulos și colab., 2004; Latournerie și colab., 2008; Nosho și colab., 2009; Mulder și colab., 2011). Recunoașterea cancerului colorectal sincron (S-CRC) ca entitate clinică a crescut conștientizarea faptului că o examinare perioperatorie exactă a întregului colon este obligatorie la pacienții supuși rezecției CRC. Cu toate acestea, rămâne nesigur dacă S-CRC are caracteristici prognostice și moleculare diferite de CRC solitar.
Studiile caz-control care examinează caracteristicile și rezultatul pacienților cu S-CRC au oferit rezultate contradictorii. Sex masculin (Oya și colab., 2003; Latournerie și colab., 2008; Mulder și colab., 2011), bătrânețe (Passman și colab., 1996; Papadopoulos și colab., 2004; Wang și colab., 2004; Mulder și colab., 2011), adenoamele coexistente (Chen și Sheen-Chen, 2000; Latournerie și colab., 2008) și supraviețuirea mai slabă (Oya și colab., 2003; Nosho și colab., 2009; Mulder și colab., 2011) au fost asociate cu S-CRC în unele serii, dar nu la alții. Este posibil ca aceste neconcordanțe să reflecte o prejudecată în selectarea cazurilor de index, precum și în recrutarea controalelor cu CRC solitar. În special, diferite serii pot avea prevalențe variabile ale cancerelor cu instabilitate microsatelitică (MSI), care sunt asociate cu leziuni multiple (Pedroni și colab, 1999; Dykes și colab, 2003; Nosho și colab, 2009; Bae și colab, 2012), dar și cu un prognostic mai bun (Gryfe și colab., 2000; Malesci și colab., 2007).
Având în vedere interacțiunile complexe dintre rezultat și diferite profiluri moleculare, este evident că semnificația prognostică a S-CRC poate fi evaluată în siguranță numai prin analiza subgrupurilor moleculare unice de CRC. Mai mult, analiza ar trebui extinsă la adenoamele sincrone avansate care sunt asociate și cu CRC metacronice (Moon și colab., 2010). Căutările retrospective pentru adenoamele sincrone sau S-CRC au fost efectuate în registrele colonoscopiilor perioperatorii efectuate la 881 de pacienți consecutivi al căror CRC rezecat fusese clasificat inițial în subclasele moleculare pe baza statutului microsateliților și a BRAF. Au fost apoi evaluate caracteristicile clinicopatologice și rezultatul pacienților cu neoplazie sincronă avansată.
Materiale și metode
Studiul populației și subgrupurilor de CRC din cauza neoplaziei sincrone
Studiul a vizat includerea a 1000 de pacienți consecutivi care au suferit o operație de rezecție pentru CRC la Clinica și Centrul de Cercetare Humanitas în perioada 2 februarie 1998 - 6 aprilie 2006. Criteriile de excludere au fost limitate la următoarele: (1) absența invaziei submucoase în patologie; (2) recurența anastomotică a unei tumori colorectale rezecate anterior; (3) diagnosticul polipozei adenomatoase familiale; (4) CRC asociat cu boli inflamatorii intestinale. Protocolul a fost aprobat de Comitetul de Etică al instituției și consimțământul informat al pacienților cu privire la prelucrarea datelor lor personale a fost obținut de către medicul de referință sau de către alți medici implicați în studiu. În analiza preliminară a înregistrărilor, 119 pacienți (dintre care niciunul cu S-CRC) au fost excluși din cauza colonoscopiei perioperatorii incomplete sau de calitate slabă, ducând la o populație de studiu finală de 881 subiecți.
Subtipul tumorii moleculare
Probele tumorale de la toți pacienții și toate tipurile de cancer de la pacienții cu S-CRC au fost examinate pentru MSI. Mononucleotidele BAT-26 și mononucleotidele BAT-25 la pacienții care îndeplinesc criteriile Amsterdam II și/sau criteriile Bethesda (n = 279) au fost utilizate ca markeri moleculari ai MSI (Hatch și colab, 2005; Laghi și colab, 2008). ADN-ul a fost obținut din secțiuni de tumori încorporate în parafină care conțin cel puțin 50% celule tumorale sau din microdisecții tumorale. Lociții BAT-25 și BAT-26 au fost amplificați prin primeri de fluoresceină și analizați prin electroforeză pe gel capilar (ABI PRISM 310 Genetic Analyzer, Applied Biosystems, Monza, Italia) (Aaltonen și colab., 1998; Malesci și colab., 2007).
În toate MSC CRC-uri, un defect în repararea nepotrivirii (MMR) a fost evaluat prin lipsa expresiei nucleare a hMLH1 (clona G-168-15, BD Bio sciences, Buccinasco, Milano, Italia), hMSH2 (clona FE11, Calbiochem, Merk Millipore, Darmstadt, Germania) sau hMSH6 (clona 44, BD Bio sciences) în imunohistochimie (Truninger și colab., 2005). Expresia proteinei de reparare a nepotrivirii a fost, de asemenea, verificată în tumorile MSS ale pacienților care îndeplinesc criteriile Amsterdam (n = 10). Pacienții cu MSI CRC au suferit teste genetice germinale pentru mutațiile MLH1, MSH2 și MSH6 prin secvențierea defectelor MMR în cancerul primar (Wahlberg și colab., 2002). O analiză de amplificare a sondei de ligare multiplă (probemix SALSA MLPA P003 MLH1-MSH2, probemix P248 MLH1-MSH2, probemix P072 MSH6, Medical Research Council-Holland, Amsterdam, Olanda) a fost efectuată la pacienții cu mutație negativă.