Efectul enzimelor proteolitice și al abstinenței sexuale în cuantificarea biochimică a

Efectele enzimelor proteolitice și sexuale
abstinență la nivelurile de -glucozidază
în plasma seminală umană

enzimelor

Patricio Peña S 1,2, Raúl Sánchez G, Belgia Vásquez P 1,3,
Claudia Castillo K 1, Werner Miska 4

Primit la 18 decembrie 2000. Acceptat în versiunea corectată la 16 ianuarie 2001.
Sursă de finanțare: Programul MECE-SUP FRO-98, Proiect: "Consolidarea programului
Capacitate regională științifică, tehnologică și productivă. "Direcția de cercetare
(9735-9820), Universidad de La Frontera Temuco și DFG-GTZ-93.2157.106.100.
Departamentul de Științe de Bază, Departamentul de Științe Preclinice și Centrul pentru Biotehnologie în Reproducere, Facultatea de Medicină, Universidad de La Frontera, Temuco, Chile.
Departamentul de andrologie, J-L-Universität Giessen, Germania.
1 tehnolog medical, 2 MCS, 3 licență în științe

Acest studiu a fost conceput cu următoarele obiective: 1) pentru a obține valori de referință ale α-glucozidazei prezente în plasma seminală a donatorilor normali. 2) determinați în probele de material seminal de la donatori normali efectul adăugării enzimei proteolitice a -chimotripsină asupra activității unei -glucozidaze; și 3) să evalueze posibilul efect al duratei abstinenței sexuale asupra activității α-glucozidazei în probe seriale ale pacienților din Programul de crioconservare a spermei.

MATERIAL ȘI METODĂ

După consultarea și aprobarea de către Comitetul de Etică al Facultății de Medicină, prin consimțământul informat, donatorii au fost selectați pentru acest studiu în rândul studenților Universității noastre și pacienților care au participat la policlinica de andrologie, excluzând din acesta subiecții cu boli anterioare și cu transmitere sexuală. Evaluarea α-glucozidazei a fost determinată în mod obișnuit în plasma seminală de la pacienții care au nevoie de crioconservare a spermei.

Efectul α-chimotripsinei asupra activității α-glucozidazei. Concentrații crescânde (de la 0,1 la 10 mg/ml) de α-chimotripsină 18 au fost adăugate la probe de plasmă seminală de la donatori normali (n = 6), care au fost menținute la -20 ° C până la testare. Ulterior, activitatea α-glucozidazei a fost cuantificată. Valoarea inițială a fiecărui donator a fost determinată anterior și considerată ca fiind 100% comparabilă cu valorile obținute din probele la care s-a adăugat -chimotripsina.

Monitorizarea α-glucozidazei în probe de plasmă seminală obținute în serie. Probele seriale au fost colectate de la 9 pacienți prin Programul de crioconservare a spermei din Laboratorul de andrologie, UFRO. Probele au fost grupate în trei grupuri: numărul 1 a corespuns abstinenței de 2 zile, numărul 2 până la 4 zile și numărul 3 până la 6 zile de la început, dar toate au fost luate succesiv, în așa fel încât, între ele, abstinența a corespuns întotdeauna la 2 zile. Prelucrarea plasmei seminale a fost așa cum s-a descris anterior.

Determinarea valorilor de referință. La donatorii normali, activitatea izoformei a-glucozidazei neutre a fost de 14,52 până la 25,9 µU/ml (= 19,32 µU/ml; SD = 1,13; SEM = 0,16) prin metode parametrice. Intervalul normal a fluctuat între 15,85-23,46 µU/ml în cazul metodelor non-parametrice (Figura 1).

Efectul enzimelor proteolitice. Utilizarea α-chimotripsinei în concentrații crescânde de la 0,1 la 10 mg/ml nu a modificat semnificativ activitatea α-glucozidazei (Figura 2). Având în vedere că concentrațiile de până la 10 ori cele recomandate în mod normal (1 mg/ml) au fost utilizate pentru a dizolva plasma seminală la pacienții cu lichefiere afectată.

Analiza plasmei seminale oferă un sprijin important pentru diagnosticarea diferitelor patologii care afectează sistemul reproductiv masculin 19. Cuantificarea prezenței enzimei α-glucozidază se corelează direct cu funcția epididimului. Prin urmare, nivelurile peste valorile de referință ar fi direct legate de pacienții cu infecție și nivelurile scăzute sugerează obstrucție sau agenezie a canalului deferent, cu valori apropiate de cele prezentate de pacienții cu vasectomie. Pentru a aplica în mod corespunzător această tehnică laboratorului clinic, a fost necesar să se determine valorile normale de referință ale populației chiliene. La 50 de eșantioane de voluntari cu o analiză seminală normală, s-a aplicat metoda statistică parametrică, care cu o dimensiune mică a eșantionului 17 poate fi aplicabilă întregii populații studiate. Rezultatele obținute de la o valoare medie normală de 19,32 µU/ml (SD = 1,13; SEM = 0,16) au fost foarte asemănătoare cu cele descrise pentru populația europeană (20 µU/ml) 16 .