Fenotipul obezogen al descendenților mamelor hrănite cu o dietă bogată în

descendenților

  • Subiecte
  • rezumat
  • Fundal:
  • Scop:
  • Metode:
  • Rezultate:
  • Concluzie:
  • Introducere
  • Materiale și metode
  • Animale și diete
  • Testul oral de toleranță la glucoză, creșterea în greutate și aportul de alimente
  • Colecție de țesături
  • Expresia genelor hipotalamice
  • Analiza concentrației de folat
  • Analiza globală a metilării ADN hipotalamic
  • Analiza statistică
  • Rezultate
  • Aportul alimentar, creșterea în greutate și răspunsul la glucoză
  • Expresia genelor hipotalamice
  • Statutul de folat
  • Starea globală de metilare
  • Discuţie

Subiecte

  • Expresia genelor
  • Hipotalamus
  • Suplimente nutritive
  • Obezitatea

rezumat

Fundal:

Dietele bogate în multivitamine (de 10 ori AIN-93G, HV) hrănite în timpul sarcinii la șobolani Wistar cresc caracteristicile sindromului metabolic la descendenți atunci când sunt înțărcate la dieta recomandată cu vitamine (RV).

Scop:

Pentru a determina dacă efectele dietelor gestaționale de VH asupra fenotipurilor obezogene la descendenți apar ca o consecință a controlului hipotalamic modificat al comportamentului de hrănire și dacă aportul lor crescut de alimente ar putea fi prevenit prin hrănirea lor cu VH sau folat ridicat (de 10 ori folatul, HFol) diete

Metode:

Descendenții bărbați ai mamelor hrănite cu dieta HV în timpul sarcinii înțărcați cu diete RV, HV sau HFol au fost comparate cu cei născuți de mame de baraj RV și înțărcați în dieta RV timp de 29 de săptămâni. Aportul alimentar pentru 72 de ore și greutatea corporală au fost măsurate la fiecare două săptămâni și, respectiv, săptămânal. Răspunsul glucozei la o sarcină de glucoză a fost măsurat la 18 săptămâni după înțărcare. Expresia genelor hipotalamice a neuropeptidelor legate de alimente, inclusiv neuropeptida Y, pro-opiomelanocortina (POMC), receptorul insulinei, receptorul leptinei, factorul neurotrofic derivat din creier (BDNF), receptorii dopaminei (DopaR1/2/5) și serotonina (SeroR1A/2A/2C), precum și metilarea globală a ADN-ului și concentrațiile de folat din creier și plasmă au fost măsurate la 29 de săptămâni după înțărcare.

Rezultate:

Dietele pentru catelus HV sau HFol au crescut concentrațiile de folat din creier și plasmă și au prevenit creșterea consumului de alimente (5%, P = 0,03), greutatea corporală (8%, P = 0,0006) și răspunsul glucozei la o încărcare de glucoză (36%, P = 0,02 ) găsite la cei hrăniți cu dieta RV. Expresia POMC anorectică (P = 0,004) și BDNF (P = 0,02) a fost mai mare, iar DopaR1 a fost mai mică (P = 0,06) la puii hrăniți cu dieta HV. Dieta pentru catelus HFol a adus BDNF parțial la nivelul de control (P = 0,02) și a redus SeroR2A (P = 0,008). Expresia altor gene nu a fost afectată. Metilarea generală a ADN-ului a fost similară între grupurile de dietă.

Concluzie:

Fenotipul obezogen la descendenții prăzilor hrănite cu HV este prevenit prin hrănirea dietelor de pui HV sau HFol, posibil datorită modulației post-înțărcare a mecanismelor de reglare a consumului de alimente.

Introducere

Materiale și metode

Animale și diete

Diagrama schematică a studiului ( la ) design si ( ) protocol pentru descendenții masculi de la 0 la 29 de săptămâni după înțărcare. Abrevierile dietei: RV, dieta AIN-93G cu vitaminele recomandate; HV, de 10 ori amestecul multivitaminic recomandat; HFol, RV + de 10 ori conținutul de folat. Dietele consumate în timpul sarcinii sunt indicate înainte de linia de bord. Dietele consumate de descendenți au fost notate după linia de bord.

Imagine la dimensiune completă

Testul oral de toleranță la glucoză, creșterea în greutate și aportul de alimente

Figura 1b descrie protocolul de studiu. Aportul alimentar timp de 72 de ore a fost măsurat la fiecare 2 săptămâni de la 0 la 29 săptămâni după înțărcare. Greutatea corporală a fost măsurată la naștere și la înțărcare, iar creșterea în greutate a fost calculată săptămânal de la 0 la 29 de săptămâni după înțărcare. Răspunsul glucozei la sonda glucozei (0,375 g glucoză per ml, 5 g glucoză per kg de greutate corporală) a fost măsurat la 18 săptămâni după înțărcare. Șobolanii au fost postiti peste noapte timp de 10 ore înainte de măsurarea glucozei. O probă de sânge a fost extrasă din vena cozii și glucoza bazală a fost testată imediat folosind un glucometru comercial (MediSense Precision Xtra, Abbott Laboratories, Abbott Park, IL, SUA). După măsurarea glucozei, concentrațiile de glucoză din sânge au fost determinate 15 și 60 de minute mai târziu și a fost calculată aria incrementală de sub curbă.

Colecție de țesături

Creierul întreg de șobolan a fost îndepărtat rapid după decapitare la 29 de săptămâni după înțărcare și imediat înghețat pe gheață uscată și apoi depozitat la -80 ° C. Creierele au fost decongelate pe gheață, iar laturile dreaptă și stângă ale hipotalamusului au fost disecate separat folosind metoda descrisă mai sus. 14 Chiasma optică a fost utilizată ca demarcare a părții anterioare a hipotalamusului. Aceasta trece prin comisura anterioară, care a fost utilizată ca limită orizontală. Linia dintre hipotalamusul posterior și corpurile mamilare a fost considerată o secțiune caudală. Blocurile hipotalamice disecate conțineau nuclee complexe preoptice, supraoptice, paraventriculare, anterioare, suprachiasmatice, dorsomediale, ventromediale, arcuate, mamilare, posterioare și laterale. Partea dreaptă a hipotalamusului a fost utilizată pentru expresia relativă a genei și partea stângă pentru starea de metilare a ADN-ului. Partea stângă a creierului rămas a fost utilizată pentru a măsura concentrația de folat. Sângele portbagaj a fost colectat și centrifugat și s-au adăugat probe de plasmă cu acid ascorbic 0,5% pentru a preveni oxidarea folatului.

Expresia genelor hipotalamice

Fiecare hipotalamus disecat a fost omogenizat utilizând un omogenizator de rupere tisulară (Qiagen Tech., Mississauga, ON, Canada). ARN-ul probelor omogenizate a fost izolat folosind reactivul Trizol și extracția cu cloroform conform protocolului producătorului (Invitrogen, Grand Island, NY, SUA) și cuantificată de Nanodrop 1000. ADNc a fost sintetizat folosind kitul de arhivă ADNc de mare capacitate la ABI (Applied Biosystems, Foster City, CA, SUA) Gene Amp PCR System 2700.