CAPITOLUL 15
METODE DE ANALIZĂ PENTRU DETERMINAREA AZOTULUI ȘI A COMPONENTELOR NITROGENATE DIN ALIMENTE
Nalda romero
METODE DE DETERMINARE TOTALĂ A AZOTULUI
1. Metoda Kjeldahl
Se caracterizează prin utilizarea acidului sulfuric concentrat, care fierbe, care afectează distrugerea oxidativă a materiei organice a probei și reducerea azotului organic la amoniac. Amoniul este reținut ca bisulfat de amoniu și poate fi determinat in situ sau prin distilare și titrare alcalină.
Dificultăți chimice și practice
Conversia cantitativă a azotului în amoniac.
Acțiune corozivă a acidului sulfuric asupra sistemului de extracție a fumului.
Considerații de mediu privind evacuarea fumului și contaminarea apei cu catalizatori metalici.
Creșteți raportul sulfat de potasiu/acid sulfuric (1 g. 1 m1) t ° 370-410 ° C.
Utilizarea catalizatorilor metalici.
Utilizarea H2O2.
Catalizatori metalici uzati
la) Oxid de mercur
Apăsați recuperarea azotului
Dezavantaje
Toxic.
Preț mare.
Poluarea apei.
Formarea compusului stabil cu amoniac care trebuie descompus cu adaos de tiosulfat de sodiu.
b) Amestec de seleniu sau cupru și sulfat de seleniu
Seleniul poate provoca pierderi de azot.
c) Amestec de sulfat de cupru și dioxid de titan
Util în analiza cerealelor.
Utilizare pe scară largă ca rutină.
Mai puțin eficient în recuperarea azotului.
Determinarea amoniului
Amoniacul din digestor poate fi determinat prin diferite metode:
- Adăugarea excesului de alcali la digestor, distilarea și titrarea amoniului.
- Amestec alcalin de fenol cu hipoclorit de sodiu care dă o culoare albastră cu amoniac.
- Amestec alcalin de salicilat de sodiu, nitroprusidă de sodiu și hipoclorit de sodiu care conferă o culoare verde smarald strălucitor cu amoniac.
- Determinarea electrometrică utilizând un electrod ionic specific și o soluție de hidroxid de sodiu 1% .
Avantajele metodei Kjeldhal
Potrivit pentru diferite tipuri de produse.
Fiabilitate ridicată.
Folosit ca metodă de referință.
Dezavantaje ale metodei Kjeldhal
Compușii azotați neproteici interferează.
Utilizarea catalizatorilor toxici sau costisitori.
Alegerea factorului de conversie.
Două. Metoda Dumas
Se caracterizează prin piroliza completă a probei și măsurarea conținutului de azot al gazelor arse.
Azotul poate fi măsurat cu un manometru după absorbția dioxidului de carbon într-o soluție alcalină sau prin conductivitate termică în metode automate.
Prezintă echivalențe satisfăcătoare în comparație cu metoda Kjeldahl în analiza furajelor și a alimentelor pentru copii, deși cu valori ușor mai mari.
Dezavantaje
Include azot anorganic.
Necesită cantități mici de probă 5-50 mg, fin împărțite și omogene pentru a minimiza eroarea de eșantionare.
Această metodă nu poate fi aplicată materialului umed, deci trebuie uscată în prealabil.
3. Metode radiochimice
Au fost descrise două metode:
la) Activarea neutronilor
O cantitate mare de probă este iradiată cu neutroni, ceea ce determină trecerea de la 14 N la 13 N. Acest pozitron are un timp de înjumătățire de 10 minute și emite radiații gamma care sunt înregistrate într-un contor de scintilație. Numărurile sunt legate de conținutul de azot al probei.
Simplu; Rapid.
Fără probleme de contaminare.
Valorile găsite prezente
o bună corelație cu metoda
Kjeldahl.
Costul infrastructurii este foarte mare.
b) Activarea protonului
Similar cu precedentul cu varianta că proba este iradiată cu protoni și se efectuează conversia de 14 N la 14 O, un izotop care se descompune odată cu emisia unui proton și radiație gamma, care sunt înregistrate și legate de conținut de probă de azot.
METODE DE DETERMINARE DE PROTEINE
Există mai multe metode alternative de determinare a proteinelor:
1. Folosind factorul de conversie
a) Determinați conținutul total de azot și multiplicați cu un factor de conversie azot în proteine. Acest factor a fost calculat luând în considerare procentul de azot pe care îl conține proteina în alimente.
Dezavantaje ale utilizării factorului conversie:
În scopuri de calcul, se ia în considerare conținutul de azot al proteinei principale și nu al întregului amestec.
Fracția analizată nu este neapărat proteină pură.
Nu se fac corecții cu azot neproteic.
S-a sugerat determinarea factorului de conversie azot în proteine utilizând compoziția de aminoacizi a alimentelor de analizat, lucru complicat la combinarea alimentelor, pentru care se preferă continuarea cu utilizarea factorilor tradiționali, informând la rândul său factorul utilizat.
b) Determinați conținutul de azot proteic și multiplicați cu un factor de conversie azot în proteine.
S-au folosit diverse metode pentru separarea proteinelor de compușii azotati neproteici, printre care se remarca:
dializă și ultrafiltrare prin membrană;
coagulare termică (nu este eficientă pentru cazeină și gelatină);
Dezavantaje
Diferențe în fracțiunile proteice obținute prin diferitele metode. Ar trebui luate în considerare retențiile posibile asupra proteinelor precipitate din molecule mici neproteice prin adsorbție sau schimb de ioni. Probleme legate de utilizarea factorului de conversie azot la proteine.