Relația dintre activitatea citotoxică și metabolismul bioenergetic al compușilor părinți
Relația dintre activitatea citotoxică și metabolismul bioenergetic al compușilor de origine vegetală. Proiect final de studii [Scrie aici] Facultatea de Biologie Pablo Fuentes Orozco. Sevilla, 2015
Părinților și surorii mele, pentru că m-au motivat și au crezut în mine din momentul în care am început acest proiect numit carieră. Mamei mele, vă mulțumesc pentru acea afecțiune pe care mi-o transmiteți și pentru că ați pus toată pasiunea în mine. Tatălui meu, îți mulțumesc că m-ai învățat ce este curajul și pentru că nimeni nu știe să asculte așa cum faci tu. Aș dori să-i mulțumesc tutorelui meu Javier Ávila, vă mulțumesc că m-ați ghidat cu răbdare și spirit, de asemenea, Elena Talero, Azahara Rodríguez și Antonio Alcaide, pentru fiecare gest de încurajare și pentru că mi-ați pus timpul la dispoziție. În sfârșit și nu mai puțin important, mulțumită fiecăruia dintre prietenii care au fost alături de mine în acești ani, primilor și ultimilor care au sosit, fiecărui nebun care îmi face ziua și tuturor celor care m-au ascultat și m-au susținut când nu sunt. nu era nimeni. Vă mulțumim că ați făcut din familie un grup de prieteni. Mulțumesc Kalise. Dacă chiar îți pasă de ceva, luptă pentru asta. Dacă lovești un zid, treci prin el! Există ceva ce ar trebui să știi despre eșec. Nu ar trebui să-l lași niciodată să te învingă. (Căpitanul Haddock)
INDEX Abrevieri Rezumat i ii I. INTRODUCERE 1 1. Oxilipinas în Regatul Vegetal 1 1.1. Jasmonates. Funcții biologice 2 1.2. Jasmonatul de metil ca agent cu activitate anticanceroasă 3 2. Oxilipinele din regnul animal 5 3. Starea actuală a cancerului 6 II. OBIECTIVE 8 III. MATERIALE ȘI METODE 9 1. Materialul utilizat 9 1.1. Jasmonat de metil 9 1.2. Culturi celulare 10 2. Studii in vitro 11 2.1. Evaluarea activității citotoxice a jasmonatului de metil 11 2.1.1. Metoda sulforodaminei B 11
2.2. Studii de metabolism bioenergetic 12 2.2.1. Cuantificarea ATP 14 2.3. Evaluarea activității antiinflamatorii a jasmonatului de metil 14 2.3.1. Producerea factorului de necroză tumorală-alfa 14 3. Analiza statistică 15 IV. REZULTATE 16 1. Activitatea citotoxică a jasmonatului de metil 16 2. Mecanisme citotoxice. Efecte asupra metabolismului bioenergetic 19 3. Activitatea antiinflamatoare a jasmonatului de metil 21 V. DISCUȚIE 23 VI. CONCLUZII 27 VII. BIBLIOGRAFIE 28
Abrevieri Acid arahidonic AA ADP adenozin bisfosfat AJ acid iasmonic ANOVA analiză a varianței ATP adenozin trifosfat CJ cis-iasmonat COX ciclooxigenază DEX dexametazonă DHA acid docosahexaenoic DMSO dimetilsulfoxid Test ELISA enzimă enzimatică enzimatică ICARIC concentrație 50 IL interleukină J2 metil 4,5-didehidrojasmonat J7 metil 5-clor-4,5-didehidrojasmonat LLC leucemie limfocitară cronică LOX lipoxigenază LPS lipopolizaharidă MJ metil jasmonat Organizația OMS pentru sănătate mondială PMA acetat de forbol miristat ROS specii reactive la oxigen SRB sulforodamină B TCA acid tricloracetic THP-1 leucemie acută umană linie monocitară TNF-α tumoră factor de necroză alfa TRAIL TNF-α 2-DG legat de apoptoză care induce ligand 2-deoxi-D-glucoză i
Figura 1. Funcțiile biologice ale jasmonaților și semnalizarea acestora mediate de procese biotice și abiotice. 1.2. Jasmonat de metil ca agent cu activitate anticancerigenă. MJ este o ciclopentanonă naturală (Figura 2) care aparține familiei oxilipinei ca hormoni de răspuns la stresul plantelor (Liechti și Farmer, 2002). Producția sa este indusă de diferite tipuri de semnale abiotice de mediu (radiații UV, stres osmotic și variație de temperatură) și biotice (agenți patogeni, erbivori) (Ryals și colab., 1996; Beckers și Spoel, 2006; Van der Ent și colab., 2009) și mediază semnalizarea care activează răspunsurile defensive împotriva acestor tipuri de stres (Vasyukova și colab., 2009). Pe lângă faptul că acționează ca metabolit secundar al plantei, inducând apărarea plantelor, MJ are un efect notabil asupra celulelor canceroase la mamifere (Avdiushko și colab., 1995; Kato și colab., 1993; Melan și colab., 1993; Fingrut și Flescher, 2002 ). Jasmonatele modifică funcția mitocondrială a plantei și induc formarea speciilor reactive de oxigen (ROS), ducând la moartea celulară pe o cale similară cu apoptoza la mamifere (Soares și colab., 2010; Zhang și Xing, 2008). S-a constatat că MJ are 3