PCR-Multiple pentru diagnosticarea Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum

pcr-multiple

В
В 		В

Servicii personalizate

Revistă

  • SciELO Analytics
  • Google Scholar H5M5 ()

Articol

  • Spaniolă (pdf)
  • Articol în XML
  • Referințe articol
  • Cum se citează acest articol
  • SciELO Analytics
  • Traducere automată
  • Trimite articolul prin e-mail

Indicatori

  • Citat de SciELO

Linkuri conexe

  • Similar în SciELO

Acțiune

Jurnalul peruvian de medicină experimentală și sănătate publică

versiune tipărităВ ISSN 1726-4634

Pr. Peru. med. exp. sănătate publică vol.24 nr.2 Lima în aprilie/iunie 2007

ARTICOLE ORIGINALE

PCR-Multiple pentru diagnosticarea Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum și Ureaplasma urealyticum

MГєltiplex-PCR pentru diagnosticarea Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum și Ureaplasma urealyticum

Cuvinte cheie: Infecții cu micoplasme; Infecții cu ureaplasma, reacție în lanț a polimerazelor, uretrită non-gonococică (sursă: DeCS BIREME).

Cuvinte cheie: Infecții cu micoplasme; Infecții cu ureaplasma; reacție în lanț a polimerazei; Uretrita non gonococală (sursă: DeCS BIREME).

INTRODUCERE

Speciile de micoplasme și ureaplasme au fost asociate cu diferite boli ale tractului respirator și urogenital, atât la femei, bărbați, cât și la copii. Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma parvum și Ureaplasma urealyticum au fost cele mai frecvent identificate specii1.

Aceste microorganisme aparținând clasei Mollicutes sunt considerate extrem de dificile pentru multiplicarea lor in vitro, atât datorită cerințelor nutriționale pentru multiplicarea lor, cât și sensibilității lor marcate la modificările pH-ului, temperaturii, presiunii osmotice, razelor ultraviolete, surfactanților, anticorpilor și complement, fapt care face dificilă izolarea prin cultură bacteriologică2,3.

MATERIALE ȘI METODE

EȘANTION DE ADN DE REFERINȚĂ

SETURI PRIMER PENTRU METODA PCR-MÁLTIPLE

S-au utilizat seturi de primer MgPaF-MgPaR complementare unei regiuni a genei proteinei adezive M. genitalium (MgPa), descrisă de Jensen și colab. M. hominis și două seturi de primeri, unul dintre ei complementar unui fragment din regiunea distanțieră între genele ARN ribozomal 16S și 23S ale U. parvum, iar celălalt set complementar unui fragment din regiunea distanțier adiacent ureei genă și specifică pentru U. urealyticum, descrisă de Fernández și colab.7 (Tabelul 1).

AMESTEC DE REACȚIE

AMPLIFICAREA ADN-ului

Amplificarea ADN-ului a fost efectuată într-un ciclotermic "Personal MastercyclerR" (Eppendorf, Germania), ajustând condițiile pentru amplificarea ADN-ului tulpinilor de referință, programate la 95 ° C timp de patru minute, urmate de cicluri de 94 ° C pentru 30 de secunde, testare cu trei temperaturi diferite de hibridizare: 55, 57 și 60 ° C timp de 30 de secunde și 72 ° C timp de un minut, cu o extensie finală la 72 ° C timp de cinci minute, evaluând cu 35 și 40 de cicluri.

ANALIZA PRODUSELOR AMPLIFICATE

ÎNCERCARE CU PROBE CLINICE

Au fost analizate 34 de probe de exsudat uretral, negative la testele pentru depistarea Neisseria gonorrheae, de la același număr de pacienți de sex masculin, care au participat la Laboratorul de Microbiologie al Spitalului Militar „Carlos Juan Finlay”, în perioada octombrie-decembrie din 2005.