Lipaza stimulată de sare biliară și proteina 2 legată de lipaza pancreatică sunt

- rezumat
- Principal
- MATERIALE ȘI METODE
- Proceduri cu animale.
- Cuantificarea nivelurilor de expresie a ARNm.
- Statistici.
- REZULTATE
- DISCUŢIE
- Glosar
rezumat
În timpul copilăriei, condițiile de bază pentru digestia grăsimilor alimentare diferă de cele din viața adultă. Lipaza stimulată de sare biliară (BSSL) este o enzimă exprimată în pancreasul exocrin și, la unele specii (inclusiv la om), și în glanda mamară care alăptează și secretată cu lapte. Obiectivul acestui studiu a fost de a compara ontogenia a patru lipaze pancreatice [BSSL, trigliceride lipaza pancreatică (PL), proteina pancreatică asociată lipazei 2 (PLRP2) și fosfolipaza A2 (PLA2)] la o specie care furnizează lapte BSSL ( mouse-ul) și unul care nu (șobolanul). Am urmărit expresia celor patru lipaze pancreatice din postnatal d 1 până după înțărcare la ambele specii. Am constatat că BSSL și PLRP2, două lipaze cu specificitate largă a substratului, au dominat. Abia după înțărcare s-a indus expresia semnificativă a PL și PLA2. Prin urmare, BSSL și PLRP2 par a fi responsabile pentru digestia grăsimilor, atâta timp cât laptele este alimentul principal. Mai mult, modelul temporal timpuriu al expresiei BSSL a diferit între specii. Speculăm că BSSL de origine lactată este capabil să compenseze o ontogenie mai lentă a expresiei pancreatice BSSL la șoareci.
Principal
Pancreasul exocrin sintetizează și secretă mai multe enzime lipolitice care funcționează împreună cu lipaza gastrică pentru a obține digestia completă și absorbția grăsimilor alimentare (1). La adulți, trigliceridele lipazice pancreatice (PL) sunt principala enzimă responsabilă de digestia intestinală a trigliceridelor din dietă. De fapt, în prezența colipazei și a sărurilor biliare, s-a estimat că PL reprezintă 56% din hidroliza intraluminală a trigliceridelor din dietă la adulți (2). PL este activ în principal în tri și digliceride, în timp ce fosfolipaza A2 (PLA2) este enzima principală implicată în hidroliza fosfolipidelor din dietă la adulți (3).
Lipaza stimulată de sare biliară (BSSL) este o altă enzimă importantă implicată în digestia și absorbția grăsimilor din dietă. Similar cu PLRP2, BSSL are capacitatea de a hidroliza o varietate de substraturi, de exemplu, tri, di și monogliceride; esteri de colesteril; esteri vitaminici solubili în grăsimi; fosfolipide; galactolipide; și ceramide (15-17). BSSL este exprimat în pancreasul exocrin la toate speciile, iar la unele specii (inclusiv la oameni și șoareci, dar nu la șobolan), este exprimat și în glandele mamare care alăptează și este secretat cu lapte (18-20). BSSL derivat din lapte contribuie semnificativ la utilizarea eficientă a grăsimii din lapte la nou-născuți (1). Depleția BSSL la șoarecii modificați genetic a provocat malabsorbție a grăsimilor și alterarea epitelială derivată din grăsime ulterioară în ileonul distal (21). Interesant este că atunci când mamele adoptive care exprimă BSSL activ în laptele lor alăptează puii cu deficit de BSSL, absorbția grăsimilor a fost restabilită la normal și nu au fost găsite leziuni intestinale.
Prin urmare, laptele furnizat - BSSL contribuie la digestia eficientă a grăsimii din lapte la speciile care exprimă BSSL în glandele mamare în timpul alăptării. Evident, acest lucru nu poate fi cazul la speciile care nu secretă BSSL cu lapte. Ipotezăm că expresia lipazelor pancreatice în perioada de lactație diferă între speciile care au BSSL furnizat cu lapte și speciile care nu. Prin urmare, am comparat ontogenia lipazelor secretate de pancreasul exocrin la șoarece, care are BSSL în lapte, și șobolanul, care nu. Raportăm o expresie temporală divergentă semnificativă care susține opinia că BSSL, împreună cu PLRP2, sunt lipazele dominante implicate în digestia grăsimilor, atâta timp cât laptele este alimentul principal.
MATERIALE ȘI METODE
Proceduri cu animale.
Șoarecii Balb/c/Bkl și șobolanii Sprague-Dawley au fost cumpărați de la Scanbur AB (Sollentuna, Suedia) și crescuți intern. Animalele au fost ținute în camere cu un ciclu de lumină și întuneric 12:12 h și cu acces nerestricționat la dieta standard R34 (Lactamin, Stockholm, Suedia) și apă. Toate procedurile la animale au fost aprobate de Comitetul regional de etică în științele experimentale ale animalelor, Umeå, Suedia.
În diferite momente de timp, adică în postnatal d 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10, 12, 16, 20, 24, 28, 32 și la vârsta de 6 luni (pentru ARN) și la data postnatală 1 7, 14, 21 și 28 (pentru proteine), cel puțin trei șoareci și trei șobolani au fost sacrificați prin dislocare cervicală și pancreasul a fost îndepărtat imediat cu atenție pentru a izola ARN-ul și proteinele. Înainte de sacrificare, animalele au fost observate când au mâncat (lapte sau alimente) și apoi s-au mutat imediat într-o cușcă fără hrană (doar apă) pentru o perioadă de post de 2 ore.