Îngrijirea și întreținerea regulată a unui laborator Zebrafish (Danio rerio) Un protocol de introducere

rezumat

Acest protocol descrie întreținerea și îngrijirea regulată pentru menținerea condițiilor optime pentru reproducerea peștilor zebră. Videoclipul arată protocolul pentru întreținerea sistemului, adăpostirea, hrănirea, reproducerea și creșterea larvelor de pește zebră.

Abstract

Protocol

1. Sistem de întreținere

    Peștele zebră este păstrat într-un sistem de circulație care filtrează și aerează continuu sistemul de apă pentru a menține calitatea apei necesară pentru un mediu acvatic sănătos. De asemenea, sistemul de circulație ajută la filtrarea excesului de alimente și a excrementelor de pește. Sistemele Zebrafish sunt oferite de diferite companii, dar folosim sisteme de habitat acvatic, SUA în laboratorul nostru. Temperatura ambiantă sau temperatura rezervorului sunt, în general, menținute între 26 și 28,5 ° C, iar condițiile de iluminare sunt de 14:10 h (lumină: întuneric). Un sistem zebrafish de habitate acvatice (de exemplu, un sistem de masă) Costuri

110 mJ/cm 2 la începutul duratei de viață a lămpii și rata dozei scade în timp, făcând necesară înlocuirea balonului chiar și atunci când pare să fie încă funcțional.

48 h.
Notă: Trebuie remarcat faptul că creveții săraci ne-îmbogățiți își pierd valoarea nutrițională la fiecare oră după eclozare. Prin urmare, poate fi adecvat să clocească timp de 24 de ore sau să se îmbogățească mai mult de 48 de ore pentru a obține valoarea nutrițională maximă de la creveții de saramură.

  • Apa uzată din sistemul de eclozare se adaugă la deșeurile din carantină pentru a fi dezinfectate cu înălbitor și eliminate ulterior.
  • Pentru a colecta creveții saramură, îndepărtați tubul de aer și lăsați cultura să se stabilească timp de 4-5 minute, dar nu mai mult de 10 min. Creveții sălbatici eclozați se adună în partea de jos a Hatcher-ului.
    1. Colectați saramură de creveți folosind robinetul din partea de jos a incubatorului. Aruncați fluxul inițial, care constă din ouă de creveți săruri neecloșite.
    2. După ce ați aruncat creveții de saramură nenăscuți, colectați creveții de saramură eclozați care vor fi folosiți ca hrană pentru peștele zebră.
    3. Separați creveții de saramură de apa sărată, folosind o plasă de colectare a creveților de saramură (

      4. Creșterea larvelor

        Ouăle fertilizate au fost păstrate într-un incubator (

      28,5 ° C) timp de 72 de ore până la eclozionarea larvelor. Acum sunt larvele corionului cu înot liber și sunt gata să fie transferate într-un rezervor principal de pești. Larvele trebuie hrănite la 5 zile după fertilizare (dpf) și sunt păstrate în mijlocul embrionilor (compoziția descrisă în partea 3, 10) sau a sistemului de apă. Larvele pot fi păstrate în plăci rotunde cu

      50% sau mai mult din apa din ea se schimbă zilnic. Schimbarea apei ar trebui să includă îndepărtarea larvelor moarte sau bolnave și a oricăror alte resturi.

    4. Transferați ușor larvele într-un rezervor care conține un deflector de dimensiuni mici (în jur de 300-400 microni). Larvele moarte și bolnave ar trebui îndepărtate și câțiva mililitri de apă trebuie adăugați încet în fiecare zi.
    5. După 14 zile, rezervoarele larvare pot fi introduse în sistem și furnizate cu un curent mic de apă de ciclism (1-2 picături pe secundă). Pe măsură ce larvele cresc, fluxul de apă poate fi crescut. Diferite dimensiuni de deflectoare pot fi utilizate în funcție de dimensiunea larvelor (de ex. Dimensiunea deflectorului 300-400, 500, 700-750 și 1000 microni) și un deflector normal din plastic trebuie utilizat pentru peștii adulți.
    6. De obicei, durează 3 luni până când embrionii se dezvoltă în adulți maturi sexual.

    Rezultate reprezentative

    Câteva probleme critice care pot apărea într-un laborator de pește zebră includ blocarea alimentării cu apă a rezervoarelor individuale/tuturor rezervoarelor din sistemul de carcasă, calitatea slabă a apei și scurgerile din conductele sau rezervoarele sistemului de circulație. În plus, problemele legate de obținerea embrionilor de puiet ar putea fi un alt motiv de îngrijorare. Depanarea acestor probleme este discutată mai jos.