Fertilizare in vitro
Termenul in vitro Este un termen în latină care înseamnă în sticlă. Se folosește deoarece în primele experimente biologice în care culturile de țesuturi au fost efectuate în afara organismelor vii din care provin, acestea au fost efectuate în recipiente de sticlă, precum eprubete, cilindri sau cutii Petri.
În prezent, termenul in vitro se referă la orice procedură biologică care se efectuează în afara organismului în care ar avea loc în mod normal, pentru a-l deosebi de un experiment in vivo unde țesutul rămâne în organismul viu în care se găsește în mod normal.
În mod colocvial, bebelușii concepuți prin FIV sunt numiți bei eprubetă, referindu-se la recipiente din sticlă sau plastic numite eprubete, care sunt frecvent utilizate în laboratoarele de chimie și biologie.
Cu toate acestea, fertilizarea in vitro se desfășoară în plăci plate numite cutii Petri; cele mai frecvent utilizate farfurii Petri sunt fabricate din plastic, totuși numele FIV este păstrat.
Indicații pentru fertilizarea in vitro
Inițial, FIV a fost dezvoltat pentru a depăși situațiile de infertilitate din cauza problemelor din trompele uterine, dar ulterior s-a observat că tehnica a avut succes și în alte cazuri de infertilitate.
Introducerea injectarea intracitoplasmatică a spermei (ICSI) rezolvă în mare măsură problemele de infertilitate masculină.
Pentru ca un tratament FIV să aibă succes, este necesar să aveți ovocite sănătoase, spermatozoizi care pot fertiliza și un uter care poate menține o sarcină.
Deși în unele țări tratamentele FIV sunt acoperite de serviciile de sănătate socială, această tehnică este utilizată în mod normal atunci când alte opțiuni au eșuat, datorită faptului că FIV suportă costuri ridicate.
FIV poate fi utilizat și la femeile aflate la menopauză, folosind ovocite donatoare. Este, de asemenea, o tehnică care poate fi luată în considerare la pacienții care au suferit o pierdere totală sau parțială a fertilității datorită tratamentului agresiv împotriva unei patologii grave (cum ar fi cancerul).
Metode de fertilizare in vitro
Stimularea ovariană
Fertilizarea in vitro este inițiată în a treia zi a menstruației și constă dintr-un regim de medicamente pentru stimularea dezvoltării mai multor foliculi în ovare.
La majoritatea pacienților, se utilizează injecții cu gonadotropină (în general analogi ai FSH), cu controale frecvente ale nivelurilor de estradiol și ale creșterii foliculare prin ecografie ginecologică.
De obicei, durează 10 zile de injecții. Ovulația spontană în timpul ciclului este prevenită prin utilizarea agoniștilor GnRH sau a antagoniștilor GnRH, care blochează apariția naturală a hormonului luteinizant (LH).
Extracția ovocitelor
Atunci când maturizarea foliculului este considerată adecvată, pacientului i se administrează gonadotropină corionică umană (? -HCG).
Această moleculă, care acționează ca un analog al hormonului luteinizant (LH), va provoca ovulația la aproximativ 36 de ore de la injectare, dar procedura de îndepărtare are loc chiar înainte ca aceasta să aibă loc.
Extracția ovocitelor se realizează transvaginal, utilizând un ac ghidat cu ultrasunete, care perforează peretele vaginal pentru a ajunge la ovare.
Oocitele sunt aspirate prin ac, iar lichidul folicular este transferat în laboratorul de FIV pentru a identifica ouăle. Acesta este un proces complet delicat, extracția durează aproximativ 20 de minute și poate fi efectuată sub anestezie generală sau parțială.
Fertilizare
Odată ajuns în laborator, ovocitele extrase sunt curățate, eliminând celulele care le înconjoară și pregătindu-le pentru fertilizare. În același timp, materialul seminal se pregătește pentru fertilizare, eliminând celulele inactive și lichidul seminal.
Dacă materialul seminal provine de la un donator, acesta va fi probabil pregătit înainte de a fi înghețat și pus în carantină, iar atunci când va fi dezghețat va fi gata de utilizare.
Spermatozoizii și ovocitele sunt incubate împreună (într-un raport de aproximativ 75.000: 1) în mediul de cultură timp de aproximativ 18 ore.
Până atunci ar fi trebuit să se producă fertilizarea, iar ovocitul fertilizat ar trebui să prezinte două pronuclei.
Atunci când numărul de spermatozoizi este scăzut, un singur spermă este injectat direct în ovocit, folosind injectarea intracitoplasmatică a spermei (ICSI).
Oul fertilizat este transferat într-un mediu de cultură special și păstrat timp de aproximativ 48 de ore până când ajunge la stadiul de 6-8 celule.
Cultura embrionară
Odată ce ovulul a fost fertilizat și a fost obținut un zigot, acesta este cultivat pentru a promova diviziunea și creșterea celulară pentru a da naștere unui embrion.
Această cultură durează între 2 și 5 zile și este foarte important ca aceasta să fie efectuată în condiții optime pentru embrion, deoarece calitatea acesteia și rata de implantare a acesteia vor depinde de ea atunci când este transferată într-un uter.
Pentru ca creșterea embrionului să aibă loc în cele mai bune condiții posibile, se utilizează diferite tipuri de mediu de cultură:
Mijloace simple: compoziție simplă și ușor de preparat. Sunt optime pentru creșterea inițială a embrionului (până la 3 zile de cultură). Embrionii sunt de obicei cultivați timp de 3 zile înainte de implantare, după care vor ajunge la un stadiu de 6-8 celule.
Acest lucru permite embriologului să-și monitorizeze rata de diviziune celulară și activarea genei, pentru a se asigura că embrionul este viabil și că va fi implantat corespunzător.