Efectele anti-obezitate ale inhibitorului de lipază ct-ii, un extract de ierburi comestibile, nomame
rezumat
OBIECTIV: Să investigheze efectele inhibitoare ale CT-II, extractul Nomame Herba, asupra activității lipazei in vitro și asupra obezității la șobolanii hrăniți in vivo cu o dietă bogată în grăsimi .
PROIECTARE: Testul efectului inhibitor al CT-II asupra activității lipazei a fost realizat prin măsurarea acizilor grași liberi eliberați după incubarea mediului cu CT-II, lipaza pancreatică porcină și trioleina (experimentul 1). În experimentele in vivo, șobolanii slabi sau obezi (570-718 g) au fost hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi conținând 60% grăsimi cu sau fără CT-II timp de 8 săptămâni (experimentul 2), timp de 14 zile (experimentul 3) sau timp de 12 săptămâni (experimentul 4), respectiv.
MĂSURARE: evoluția în timp a greutății corporale, aportul alimentar, greutatea organelor (grăsime parametrială, ficat, inimă și rinichi) și parametrii plasmatici (trigliceride, colesterol total, glucoză, AST, ALT și insulină), producția de fecale grăsimi totale și colesterol total măsurat. Au fost efectuate și examene histologice hepatice.
Rezultate: CT-II a inhibat activitatea lipazei porcine într-o manieră dependentă de doză in vitro (experimentul 1). Greutatea corpului și a ficatului au fost reduse, iar examenul histologic al ficatului a arătat o îmbunătățire a ficatului gras la animalele tratate cu CT II (experimentul 2). CT-II a inhibat în mod semnificativ creșterea în greutate corporală și creșterea trigliceridelor plasmatice într-o manieră dependentă de doză, fără a afecta aportul de alimente la șobolanii slabi care au primit o dietă bogată în grăsimi. AST și ALT plasmatice crescute au scăzut, de asemenea (experimentul 3). Când șobolanii obezi care au alimentat o dietă bogată în grăsimi au fost tratați cu CT-II timp de până la 6 luni, greutatea corporală a fost inițial redusă și ulterior creșterea în greutate a fost eliminată semnificativ. Grăsimea totală corporală a fost, de asemenea, semnificativ redusă și s-a observat o reducere semnificativă a AST și ALT plasmatice (experimentul 4).
CONCLUZII: Aceste rezultate au demonstrat că inhibitorul lipazei CT-II este eficient în prevenirea și ameliorarea obezității, a ficatului gras și a hipertrigliceridemiei la șobolanii hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi.
Acces furnizat de
Introducere
Lipaza pancreatică este cea mai importantă enzimă pentru digestia trigliceridelor din dietă. 1 Aplicarea unui inhibitor de lipază a fost discutată anterior ca tratament pentru obezitate. Orlistat (Ro 18-0647), un derivat lipstatinic hidrogenat derivat din Streptomyces toxitricini, este un inhibitor puternic al lipazei gastrice, pancreatice și carboxilester 2 și s-a dovedit a fi eficient pentru tratamentul obezității umane. 3, 4, 5 Existența inhibitorilor de lipază a fost investigată în diferite produse alimentare, iar prezența acestor inhibitori a fost raportată în cereale, în tărâțe de grâu și germeni de grâu 6 și în soia 7, 8. Inhibitorii lipazei au fost căutați și în produsele naturale, cum ar fi medicamentele chinezești și diferite plante medicinale. 9
O plantă de leguminoase, Cassia mimosoides L. var. nomame Makino (Nomame Herba), este cultivat în Japonia și China și este consumat în mod tradițional ca ceai în Japonia. În cursul selectării inhibitorilor lipazei dintre produsele naturale, un extract de Nomame Herba a arătat un efect inhibitor remarcabil asupra lipazei. În prezentul studiu, au fost examinate efectul inhibitor al acestui extract, CT-II, asupra activității lipazei in vitro și efectele antiobezității la șobolanii hrăniți in vivo cu o dietă bogată în grăsimi. .
Metode
Pregătirea CT-II
CT-II a fost o fracțiune din extractul etanol apos de la Nomame Herba, conținând în principal proantocianidină (tanin condensat). Prepararea fracției a fost după cum urmează: 800 g din partea aeriană a plantei uscate au fost extrase cu 10 l etanol 50% (4 l, 3 l, 3 l, trei extracții). Extractul a fost supus unei coloane Diaion HP 20 (Mitsubishi Chemical Corporation), spălat cu 30% etanol și eluat cu 80% etanol. Soluția eluată a fost evaporată și liofilizată la sec, apoi s-au achiziționat 24 g de pulbere CT-II. Pulberea CT-II a fost utilizată ca amestec cu dieta experimentală in vivo. .
Efect inhibitor in vitro al CT-II asupra activității lipazei
Testul activității lipazei utilizând trigliceride ca substrat a fost efectuat conform metodei lui Fukumoto și colab. 10 În rezumat, efectul inhibitor al (pH 7, 4) și 1 ml soluție CT-II 50% tetrahidrofuran (THF) au fost amestecate într-o eprubetă de tip L (~ 18 × 120 mm) și 1 ml soluție porcină pancreatică lipaza (Sigma tip II, 0,71 mg/ml ca proteină în tampon McIlvaine) a fost apoi adăugată și incubată la 37 ° C timp de 15 minute cu agitare. Reacția a fost oprită prin adăugarea de etanol și acizii grași eliberați au fost titrați cu 0,05 M. NaOH. Semifabricatul a fost măsurat folosind 50% THF fără CT-II (experimentul 1).
Efectele in vivo ale CT-II asupra greutății corporale, a grăsimii corporale și a metaboliților
Animale și dietă.
Femele de șobolan Sprague-Dawley au fost utilizate în studiu. Au fost adăpostite în cuști individuale din oțel inoxidabil la o temperatură controlată (24 ± 2 ° C) și pe un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore, cu acces gratuit la apă și o dietă bogată în grăsimi sub formă de pulbere conținând 60% grăsimi, 7,5% glucide 24,5% Proteine (6,7 kcal/g) ca în studiul anterior. 11 Dieta normală care conține în principal făină de soia degresată și făină de pește se numește dietă extrudată (CE-2, Clea Japan Inc.).
Proceduri.
CT-II a arătat inițial activitate inhibitoare a lipazei în studiul in vitro. Deoarece aportul excesiv de grăsimi alimentare contribuie la dezvoltarea obezității, efectele preventive ale extractului asupra dezvoltării obezității au fost examinate la șobolanii hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi. După adaptarea la dieta bogată în grăsimi și condițiile de laborator timp de 1 săptămână, șobolanii slabi cu greutatea de 239-251 g au fost împărțiți în două grupe. Grupul de control a primit doar o dietă bogată în grăsimi; Celălalt grup a primit o dietă bogată în grăsimi cu CT-II amestecat într-o concentrație de 2,5%. Greutatea corporală este măsurată în fiecare săptămână. După 8 săptămâni de tratament cu CT-II, animalele au fost sacrificate, greutatea organelor au fost măsurate și organele au fost examinate histologic (experimentul 2).