Un model de mouse al protocolului de obstrucție parțială intestinală (tradus în spaniolă)

rezumat

Obstrucțiile intestinale sunt o obstrucție parțială sau completă a intestinului care poate provoca dureri abdominale severe, greață, vărsături și prevenirea trecerii scaunului. Această procedură de creare a obstrucțiilor intestinale parțiale la șoareci este fiabilă în studierea mecanismelor de creștere patologică a celulelor și de deces în intestin.

Abstract

Introducere

Obstrucțiile intestinale sunt o obstrucție parțială sau completă la nivelul intestinului subțire sau gros care împiedică mișcarea alimentelor, lichidelor și gazelor digerate prin intestine 1. Datorită obstrucției, obstrucția determină îngroșarea pereților intestinali, îngustarea lumenului 2. Obstrucția intestinală poate apărea ca rezultat al intervențiilor chirurgicale abdominale sau pelvine care determină formarea țesuturilor din aderențe abdominale sau din afecțiuni gastrointestinale, cum ar fi boli inflamatorii intestinale (boala Crohn), diverticulită, hernie, volvulus, strictură, invaginație, constipație, impactul fecal, pseudo- obstrucție, tumori și cancere de 3, 4, 5. Obstrucțiile intestinale în aceste cazuri duc adesea la hipertrofia tunicii musculare a intestinului 6 .

PO de lumen induce distensie intestinală și crește grosimea stratului muscular neted în jurul obstrucției ca răspuns la necesitatea de a urmări peristaltismul funcțional 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13. Modele animale de PO intestinal au fost dezvoltate pentru a studia hipertrofia mușchilor netezi la șoareci 7, șobolani 10, cobai 11, câini 12 și pisici 13 care dezvoltă în mod constant hipertrofie similară în straturile musculare intestinale.

Aici, vă propunem un protocol murin pentru intervenția chirurgicală intestinală, folosind un inel din silicon. Șoarecii care primesc o intervenție chirurgicală hipertrofiată în mod fiabil tunica musculară a intestinului. În mușchiul hipertrofic, SMC, ICC, PDGFRα + și celulele neuronale sunt remodelate dramatic.

Abonament necesar. Vă rugăm să recomandați JoVE bibliotecarului dvs.

Protocol

Următorul protocol a fost aprobat de Comitetul instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor (IACUC) de la Universitatea din Nevada Reno (UNR) Resurse și respectă toate eticile privind utilizarea animalelor de cercetare.

Obțineți șoareci C57BL/6 maturi (4-6 săptămâni) între 20-30 g. casa coloniei de șoareci de laborator într-un centru centralizat pentru animale la resursele UNR.

2. chirurgie de obstrucție parțială

Notă: Operațiile se efectuează într-o cameră dedicată procedurilor chirurgicale. Toate instrumentele chirurgicale sunt autoclavizate înainte de operație. Mănușile și halatele chirurgicale sterile trebuie să fie purtate de tot personalul din camera chirurgicală în orice moment.

3.0 longitudinal cu bisturiul cu 15 lame, asigurându-se că numai pielea este incizată și evitând tăierea în stratul musculoperitoneal în acest moment. Folosind forcepsul și foarfecele chirurgicale, separați cu grijă pielea de stratul musculoperitoneal, fără a provoca incizii ale stratului musculoperitoneal. După ce straturile s-au separat suficient (aproximativ 1 cm x 4 cm), identificați linia alba în stratul musculoperitoneal și tăiați

2 cm de-a lungul liniei alba pentru a expune cavitatea intraperitoneală folosind micro-forceps și foarfece.

Localizați și identificați cu atenție omul orb. Îndepărtați încet și cu grijă cecumul din cavitatea intraperitoneală cu micro-forceps, aducând colonul proximal și ileonul cu cecul pe draperia sterilă. Umeziți imediat țesutul intestinal cu un tifon steril cu soluție salină 0,9% și mențineți țesuturile expuse umezite în permanență în afara cavității abdominale.

Localizați și identificați mezenterul dintre ileon și colonul proximal. Faceți o incizie (

3. observarea postoperatorie.

După finalizarea operației, mutați animalele într-un incubator într-o cameră de recuperare unde temperatura și umiditatea sunt reglate. Monitorizați animalele postoperator la fiecare 15 minute pentru prima oră, apoi la fiecare 30 de minute pentru a doua oră în timp ce animalele sunt în incubator.
De îndată ce observația prescrisă este completă, mutați animalele în cușca lor individuală și monitorizați-le zilnic pentru a vedea indicațiile clinice ale durerii 18 și pentru a vă asigura că rana se vindecă în mod corespunzător, fără semne de complicații (dehiscență) prezente.

Abonament necesar. Vă rugăm să recomandați JoVE bibliotecarului dvs.

Rezultate reprezentative

Figura 1. Obstrucție intestinală parțială indusă chirurgical într-un model murin. PO a fost indus de o intervenție chirurgicală PO. Șoarecii în vârstă de o lună au fost anesteziați, abdomenul lor a fost deschis printr-o incizie, un inel de silicon a fost plasat în jurul ileonului și deschiderea a fost închisă prin sutură. Șoarecii care au suferit o intervenție chirurgicală au reușit să-și revină 8 sau 13 zile. Șoarecii asemănători vârstei și sexului au funcționat în același mod ca șoarecii PO, cu excepția faptului că nu a fost plasat un inel. (LA) Imagini brute ale tractului gastro-intestinal la șoareci care au suferit o intervenție chirurgicală PO sau SO. Imaging șoareci la 8 și 13 zile după operație (B) GIT disecat de la șoareci din intestinul subțire în amonte de inel a fost distins la 8 și 13 zile post-intervenție chirurgicală și peletele fecale din colon au fost, de asemenea, mai mici în două și 13 zile post-intervenție chirurgicală, comparativ cu 13 zile post- Șoareci de chirurgie OS pentru inelul de silicon parțial obstructiv. Barele de scară sunt de 0,5 cm. faceți clic aici pentru a vizualiza o versiune mai mare a acestei figuri.