Secreția pulsativă pe timp de zi a hormonului foliculostimulant (FSH) la oile prepubertale cu și fără

Secreția hormonului foliculostimulator pulsatil (FSH) la oile femele prepubertale cu și fără restricție alimentară

S. E. RECABARREN, Biol., M.Sc.; A. LOBOS, M.V., Mg.S.; O. POBLETE, M.V.; P. MUÑOZ, J. PARILO, Ing. Agr. Laboratorul de fiziologie și endocrinologie animală, Facultatea de Medicină Veterinară,
Universitatea din Concepción, Campus Chillán

* Finanțat de proiectul FONDECYT 1990389.

REZUMAT

Cuvinte cheie: FSH, oaie, pubertate, restricție alimentară.

Cuvinte cheie: FSH, miei, pubertate, restricție alimentară.

INTRODUCERE

Obiectivul prezentei lucrări a fost să recunoască caracteristicile secreției pulsatile diurne de FSH la ovine prepubertale cu hrănire restricționată timp de 6 până la 10 săptămâni și să le compare cu secreția de FSH prezentată de oi fără restricții alimentare de aceleași vârste.

MATERIAL SI METODE

Studiu de pulsatilitate FSH. Studiul de pulsatilitate FSH a constat în colectarea probelor de sânge (3 ml) prin cateterul jugular implantat anterior, la intervale de 10 minute pentru o perioadă de 5 ore (10: 00-15: 00 ore) la 20, 26 și 30 de săptămâni de vârstă, după 0. 6 și 10 săptămâni de restricție alimentară din grupul experimental. Probele de sânge au fost depuse în tuburi heparinizate (10 UI de heparină/ml sânge), au fost centrifugate la 1000 xg, timp de 15 minute, plasma a fost separată și înghețată la 20 ° C, până la analiza ulterioară a concentrațiilor plasmatice de FSH de radioimunotest (RIA).

Test radioimunologic FSH. Testul radioimunologic FSH a fost efectuat cu materiale de la NIADDK (SUA) urmând protocolul indicat cu materialele. Pe scurt, 200 pl de FSH ovin standard (oFSHRP) într-un interval de 0,02 până la 25,6 ng/tub sau 200 pl de probă necunoscută au fost incubate cu 100 pl de FSH iodat (oFSH I-1 AFP 5679 C) și 100 pl de antiser. împotriva FSH ovin (AFP C 5228113) timp de 24 de ore la temperatura camerei. Apoi, s-au adăugat 100 uL de al doilea anticorp și incubarea a fost continuată timp de 48 de ore. Ulterior, tuburile au fost centrifugate la 1000 x g timp de 40 min la 4 ° C, supernatantul a fost aruncat și peleta a fost cuantificată într-un spectrometru gamma LKB. Concentrația minimă detectabilă corespunzătoare a 90% din tamponul martor a fost de 0,2 ng/ml, cu un coeficient de variație intra-test de 6% și inter-test de 10%.

Determinarea caracteristicilor secreției pulsatile de FSH. Concentrațiile plasmatice de FSH ale fiecărei oi au fost analizate individual folosind programul de computer CLUSTER, dezvoltat de Veldhuis și Johnson (1986). Acest program permite identificarea, prin intermediul unui algoritm repetitiv, a fluctuațiilor hormonale definite ca impulsuri într-o serie consecutivă de probe, utilizând coeficientul de variație al RIA, frecvența de eșantionare, forma definită a impulsului atribuit de operator ( folosind 1 sau mai multe puncte pentru vârful ? și unul sau mai multe puncte pentru nadir) și diferențele statistice între puncte. Programul identifică, de asemenea, amplitudinea medie a impulsurilor, intervalul dintre impulsuri, durata impulsurilor și nadirul (media concentrațiilor plasmatice dintre impulsuri). Pentru identificarea impulsurilor FSH, a fost aleasă o formă de impuls de 3x3 pentru a defini maximul și respectiv minimul cu un test t de 2,75 (Veldhuis și Johnson, 1986). Cu această procedură, probabilitatea identificării unui impuls fals pozitiv a fost mai mică de 5%.

Analiza statistică. Parametrii secreției pulsatile a FSH: media secțiunii transversale a perioadei (ng/mL/5h), frecvența pulsului (numărul de impulsuri/5h), amplitudinea impulsurilor (ng/mL) și nadir (ng/mL) prezenți la 20, 26 și 30 de săptămâni au fost analizați în același grup prin intermediul analizei varianței pentru probe repetate într-un design de bloc, cu comparație între medii cu testul Newman Keuls folosind programul statistic GB.Stat v.6. Datele sunt afișate ca medie ± eroare standard. S-a luat în considerare un P 0,05). Pe de altă parte, la oile supuse restricției alimentare, s-a observat o tendință de scădere între 20 și 30 de săptămâni, după 10 săptămâni de restricție. Concentrația plasmatică medie de FSH (ng/mL/5h) în grupul de oi experimentale a fost mai mică cu mai mult de 50% comparativ cu concentrațiile plasmatice de FSH la oile de control (P> 0,05).

Așa cum se arată în Tabelul 1, frecvența impulsurilor FSH nu a prezentat diferențe statistice între vârstele din același grup sau între grupuri. Amplitudinea impulsurilor FSH a avut tendința de a crește între 20 și 30 de săptămâni în grupul martor, cu o scădere de peste 50% la oile cu hrănire limitată între 20 și 30 de săptămâni (P> 0,05). Amplitudinea impulsurilor a avut tendința de a fi mai mică la oile cu restricție alimentară decât în grupul martor la vârsta de 30 de săptămâni (P = 0,079), după 10 săptămâni de restricție alimentară.