FACULTATEA TEHNICĂ PENTRU DEZVOLTARE A SISTEMULUI POSTGRADUAT
SISTEM POSTGRADUAT FACULTATEA TEHNICĂ PENTRU DEZVOLTARE Lucrare de diplomă Înainte de obținerea masteratului în SISTEME DURABILE DE PRODUCȚIE A ANIMALELOR, IMUNOGLOBULINE ȘI, CA ALTERNATIVĂ A ANTIBIOOTERAPIEI ÎMPOTRIVA Escherichia coli: Tutor William BILRO PRODUCȚIA DE POLITICI PILESTERES Pablo Cedeño Reyes Guayaquil 23 aprilie 2015 i
CERTIFICAREA SISTEMULUI POSTGRADUAT Certificăm că această lucrare a fost efectuată în întregime de Magisterul Pedro Pablo Cedeño Reyes ca o cerință parțială pentru obținerea diplomei universitare de master în sisteme de producție animală durabilă. Guayaquil, aprilie 2015 DIRECTOR DE TEZĂ Dr. William López Vásquez. RECENZIONARI: Ing. Noelia Caicedo Coello. Dr. José Álvarez Alvarado DIRECTOR PROGRAM Ing. John E. Franco Rodríguez. ii
DECLARAȚIE DE RESPONSABILITATE Pedro Pablo Cedeño Reyes DECLARA CĂ: Proiectul de licență numit IMUNOGLOBULINE ȘI, CA ALTERNATIVĂ A ANTIBIOTERAPIEI CONTRA Escherichia coli ÎN SISTEME DE PRODUCȚIE A BROILERILOR DE PUI, a fost dezvoltat pe baza unei anchete exhaustive, cu respectarea drepturilor intelectuale ale terților, citatele care apar în fiecare pagină corespunzătoare, ale căror surse sunt încorporate în bibliografie. În consecință, această lucrare este a mea. În virtutea acestei declarații, sunt responsabil pentru conținutul, veridicitatea și sfera științifică a proiectului de diplomă în cauză. Guayaquil, aprilie 2015 AUTORUL Pedro Pablo Cedeño Reyes C.I. 1308992104 iii
AUTORIZAREA SISTEMULUI POSTGRADUAT Eu, Pedro Pablo Cedeño Reyes, autorizez Universitatea Catolică Santiago de Guayaquil, publicarea în biblioteca instituției a proiectului intitulat: Imunoglobuline Y, ca alternativă la terapia cu antibiotice împotriva Escherichia coli în sistemele de producție a găinilor broiler, al cărui conținut, idei și criterii sunt responsabilitatea și autoritatea mea exclusivă. Guayaquil, aprilie 2015 AUTORUL Pedro Pablo Cedeño Reyes C.I. 1308992104 iv
Mulțumesc Universității Catolice Santiago de Guayaquil. La Llaguno Cía. Ltda., Pentru că mi-a permis să desfășor această activitate de cercetare, în domeniul creșterii animalelor și asupra proprietăților pe care le dețin. Dr. Gonzalo Llaguno Figueroa, care m-a sprijinit în orice moment pe parcursul acestei investigații. Către Q.F. Soraya Tapia Bastidas, șef de producție la Laboratorios Llaguno. Doctorului Pedro Sacoto. Director de producție Laboratorios Llaguno. Către Ing. Marcos Holguín Burgos. Șef al departamentului de întreținere tehnică. Dr. Aníbal Robalino Robayo. Profesor și prieten. Domnului doctor Mauro Loor Macías. Profesor și prieten. Profesorilor noștri cu afecțiune, respect și admirație. v
INDICE CAPITOLUL CUPRINS PAGINA. 1. ABORDARE. 1 1.1. CONTEXT . 1 1.2. Descrierea obiectului anchetei. 3 1.3. Justificare. 4 1.4. Întrebări de cercetare. 6 1.5. Obiective. 7 1.5.1. General. 7 1.5.2. Specific . 7 2. CADRU TEORETIC. 8 2.1. Colibaciloza. 8 2.1.1. Incidența și distribuția. 9 2.1.2. Etiologie și patogenie. 10 2.1.3. Constatări clinice și leziuni . 14 2.1.4. Diagnostic. 15 2.1.5. Zoonoză. 17 2.1.6. Tratament. 20 2.1.7. Prevenirea. 21 2.2. Rezistența antimicrobiană a bacteriilor 22 2.3. Tratamente alternative la problemele infecțioase enterice . 25 2.3.1. Ulei esențial al plantei de oregano. 25 2.3.2. Utilizarea imunomodulatorilor 26 2.3.3. Prebiotice și probiotice . 27 2.3.4. Aditivi alimentari fitogeni (PFA). 28 2.3.5 Acizi organici 28 2.3.6. Utilizarea imunoglobulinelor Y. 29 2.4. Imunoglobulina Y, din gălbenuș de ou. 30 vi
2.4.1. Specificitatea IgY. 33 2.4.2. Transferul IgY în ou 34 34 2.4.3. Extracția și izolarea IgY din gălbenușul de ou. 35 2.4.4. Utilizarea și avantajele IgY . 36 2.4.5. Utilizarea imunoglobulinelor Y, în testele imunoserologice diagnostice 38 2.5. Titrarea virusurilor sau bacteriilor 39 2.5.1. Calificări. 39 2.5.2. Tipuri de diplome. 40 2.6. Aplicarea vaccinurilor. 43 2.7. Medii de cultură . 43 2.7.1. Clasificarea mediilor de cultură. 44 2.7.1.1. Mediile de cultură în funcție de consistența lor 44 2.7.1.2. Mijloace de cultură în funcție de scopul lor . 45 2.7.2. Medii de cultură comercială. 46 2.7.2.1. Mediul de cultură L.B. (Luria Bertani) sau Agar Miller. 46 2.7.2.2. Mediul de cultură Bulion de soia triptic (TSB). 47 2.7.2.3. MacConkey Agar Medium 48 2.7.3. Pregătirea mijloacelor de cultură . 49 2.7.3.1. Pregătirea soluției 49 2.7.3.2. Sterilizare 50 2.7.3.3. Placă turnată . 50 3. METODOLOGIE. 51 3.1. Concentrați-vă. 51 3.2. Universul. 52 3.3. Locația cercetării . 53 3.4. Echipamente și materiale. 54 3.4.1. Materiale de laborator 54 3.4.2. Materiale de teren 55 3.5. Variabile în studiu. 56 vii
3.5.1. Variabile sau categorii de cercetare 56 3.5.2. Măsurarea variabilelor. 56 3.5.2.1. Morbiditate 56 3.5.2.2. Mortalitate. 57 3.5.2.3. Costul tratamentului 57 3.6. Metode . 57 Descrierea postului . 57 3.6.1. Izolarea și secvențierea E. coli . 58 3.6.2. Titrarea bacteriei E. coli 58 3.6.2.1. Pregătirea mediilor de cultură 58 3.6.2.2. Semănatul E. coli și incubația timp de 18 ore 60 3.6.2.3. Prima diluare a E. coli (diluție 1 din 10) și incubare timp de 18 ore. 60 3.6.2.4. A doua diluare a E. coli (diluție 1 din 100) și incubare timp de 4 ore. 61 3.6.2.5. Inocularea E. coli în mediu solid și la puii de o zi 61 3.6.2.6. Perioada de observare. 61 3.6.2.7. Confruntarea imunoglobulinelor cu bacterii deja titrate. 62 3.6.2.8. Proceduri de colectare a datelor. 63 3.6.3. Studii statistice 65 3.6.4. Plan de muncă. 66 4. REZULTATE ȘI DISCUȚII. 67 5. CONCLUZII. 76 6. RECOMANDĂRI . 77 BIBLIOGRAFIE. 78 ANEXE 89 viii
INDICE TABELE CUPRINS PAG. Tabelul 1 Eficiența imunoglobulinei Y împotriva provocării cu 1 LD 50% E. coli și compararea factorului de conversie alimentară (FC) în ziua 7 după inoculare. 35 de zile . 68 Tabelul 2 Compararea factorului de conversie a furajelor (FC) în ziua 13 post-inoculare. 41 zile . 70 Tabelul 3 Siguranța imunoglobulinelor aplicate puii Ross 308. 72 Tabelul 4 Compararea costurilor tratamentului. 73 ix