Diaree postînțărcare
Detectarea și identificarea rapidă a E. coli patogen implicate în diareea după înțărcare permite un diagnostic precoce și adecvat al bolii cauzate de această bacterie.
Diagnostic clinic, epidemiologic și post-mortem
La porcii cu diaree, diagnosticul inițial se bazează în principal pe tabloul clinic, care se caracterizează de obicei prin boala enterică cauzată de E. coli. Aceasta include vârsta purcelușului, circumstanțele apariției bolii și manifestări precum materialul fecal din jurul perineului, diaree, deshidratare și moarte. Un diagnostic prezumtiv se poate face prin observarea unui pH fecal alcalin datorat prezenței unui fluid diareic secretor. Puține modificări patologice specifice pot fi atribuite bolii enterice cauzate de E. coli.
Mirosul caracteristic al conținutului intestinului subțire în timpul necropsiei este util în diagnosticul de diaree post-înțărcare cauzată de E. coli.
Dacă este posibil, este de preferat să se necropsieze unul sau mai mulți porci afectați imediat după eutanasie pentru a minimiza efectele autolizei (Figura 1).
Figura 1. Porc de înțărcare cu diaree trimis pentru examinare post-mortem. Intestinul subțire este distins,
cu gaz și lichid și prezintă alte leziuni macroscopice specifice.
Atunci când se interpretează leziunile grosiere ale intestinului, trebuie să se țină cont dacă provine de la porci morți sau eutanasiați. Prezența histopatologică a bacteriilor gram-negative, în mod normal foarte aderente la mucoasa intestinului subțire, este un indiciu puternic că diareea a fost cauzată de ETEC.
Diagnosticul diferențial al diareei post-înțărcare și al bolii enterice cauzate de infecția cu E. coli, complicat de șoc, ar include salmoneloza și gastroenterita transmisibilă, în special atunci când rata mortalității este ridicată și la porcii mai în vârstă.
Identificarea E. coli patogenă
Morfologia, fermentarea lactozei pe agar MacConkey și mirosul coloniei sunt o primă indicație a identității bacteriilor implicate în infecție.
Coloniile de tulpini ET4 F4 (K88) și F18 pozitive sunt aproape întotdeauna hemolitice pe agar de sânge. Prin urmare, prezența coloniilor hemolitice este adesea utilizată ca mijloc rapid de diagnosticare a E. coli patogen ca agent cauzal.
Cu toate acestea, trebuie remarcat faptul că în laboratorul de referință E coli de la Universitatea din Montreal se găsesc din ce în ce mai multe ETEC-uri pozitive F4 (K88) nehemolitice. În plus, diagnosticul bazat exclusiv pe prezența coloniilor hemolitice nu ar discrimina între ETEC F4 și F18 și STEC F18, ceea ce poate fi foarte important atunci când se aplică strategii de prevenire, cum ar fi vaccinarea.
Virotiparea sau determinarea factorilor de virulență este cel mai definitiv mod de a identifica E. coli patogen.
Aglutinarea plăcilor, cu sau fără particule de latex, este o metodă simplă și ușoară pentru a determina prezența E. coli producătoare de F4, dar nu este utilă pentru F18 care este slab exprimată în mediul de cultură.
Deoarece un număr mic de grupe O specifice au fost asociate cu boala enterică, E. coli patogene au fost identificate prin serotipare în unele laboratoare. Cu toate acestea, nu toate izolatele unui anumit serogrup sunt patogene și această abordare este mai utilă pentru studii epidemiologice.
Deoarece E. coli crește rapid și ușor în condiții normale de cultură, efectuarea unei PCR pe bacteriile cultivate poate fi un mod simplu, sensibil și ieftin de a detecta prezența E. coli patogenă în probe.