Terapie bazată pe celule pentru insuficiența cardiacă la șobolan Thoracotomy dublu pentru infarct miocardic și
rezumat
Implantarea unei biogrefe pentru tratarea infarctului miocardic indus de ligatura LAD într-un model de rozătoare a necesitat în mod convențional două intervenții chirurgicale pe cord deschis. Pentru a reduce mortalitatea și a oferi condiții optime pentru fixarea biomatricilor solide gelatinoase și asociate celulelor, au fost dezvoltate proceduri minim invazive.
Abstract
Introducere
Ligarea arterei coronare descendente anterioare (LAD) este un standard de aur pentru IM într-un model de animale mici, rezultând infarct transmural și o cicatrice matură. Terapia celulară aplicată în faza cronică a IM necesită o a doua intervenție chirurgicală. O sternotomie mediană este de obicei efectuată pentru a permite injecția intramiocardică a celulelor sau implantarea epicardică a biogrefelor. Astfel de proceduri chirurgicale invazive cresc rata mortalității, timpul de recuperare postoperator, durerea și riscul de infecție. Abordarea minim invazivă prezentată aici nu numai că evită această prejudecată, dar oferă și o accesibilitate optimă a inimii pentru administrarea tratamentului. MI și implantarea epicardică a celulelor asociate cu un tip de gel biomatricial se efectuează într-o inimă care bate printr-o toracotomie intercostală stângă.
Abonament necesar. Vă rugăm să recomandați JoVE bibliotecarului dvs.
Protocol
NOTĂ: Șobolanii Lewis masculi și femele, de 200-220 g, au fost adăpostiți în condiții standard de laborator (ciclu de lumină și întuneric de 12 ore, apă și alimente ad libitum, cușcă IVC). Toate animalele au fost tratate în conformitate cu recomandările Legii elvețiene FELASA și cu privire la protecția animalelor.
1. Pregătirea celulelor: izolarea celulelor stem mezenchimale din măduva osoasă
2. Prima toracotomie și legarea LAD
3. Administrarea epicardică a celei de-a doua căi de tratament a toracotomiei
Abonament necesar. Vă rugăm să recomandați JoVE bibliotecarului dvs.
Rezultate reprezentative
Toate animalele s-au recuperat în decurs de 1 oră după toracotomie. Vindecarea rănilor a fost rapidă. Nu s-a observat nicio infecție sau edem.
Toracotomia dublă stângă a permis accesul optim la inimă (Figura 1). Durerea și mortalitatea după operație au fost scăzute. Animalul s-a recuperat rapid după operație și s-a îngrășat (Figura 2). Procentul de supraviețuire Kaplan Meir a fost de 96% pentru prima toracotomie. Încă patru șobolani din 104 au murit în următoarea aplicare de tratament de 24 de ore printr-o a doua toracotomie. Procentul de supraviețuire Kaplan-Meir a variat de la 100% atunci când animalul a primit oa doua toracotomie, dar nu s-a făcut tratament (tratament fals), 96% pentru grupul de etanșant cu MSC și fibrină sau 86% când animalul a primit MSC injectat direct în miocard (Figura 3).
Evaluarea ecocardiografică în modul M efectuată la 2 săptămâni după ligatura LAD a arătat o reducere a fracției de scurtare (FS) de la 44 ± 3% la 22 ± 4%. Reprezentarea în frecvență a FS înregistrată la 104 animale 2 săptămâni de ligare a mesajului LAD a furnizat dovezi ale repetabilității metodei. (Figura 4). Coeficientul de variație (CV) a fost de 17%. În plus, ecocardiografia efectuată la 2 și 6 săptămâni după ligatura LAD a arătat o progresie către insuficiența cardiacă sugerată de o reducere a fracției de ejecție (EF) și o creștere a volumelor VS în diastolă și sistolă. (Figurile 4 Da 5). Dezvoltarea unui infarct transmural în grupul operat simulat a fost confirmată prin colorarea Goldner a secțiunilor transversale ale inimii (Figura 6).
